Molecular characterization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolates from a hospital in Ghana

Background: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) are a major cause of hospital- and community-acquired infection. They can colonize humans and cause a wide range of infections including pneumonia, endocarditis and bacteraemia. We investigated the molecular mechanism of resistance and virulence of MRSA isolates from a teaching hospital in Ghana. Methodology: A total of 91 S. aureus isolates constituted the initial bacterial sample. Identification of S. aureus was confirmed by the VITEK 2 system. The cefoxitin screen test was used to detect MRSA and antibiotic susceptibility was determined using the VITEK 2 system. The resistance (mecA, blaZ, aac-aph, ermC, and tetK) and virulence (lukS/F-PV, hla, hld and eta) genes were amplified by polymerase chain reaction (PCR) and positive samples subjected to DNA sequencing. Pulsed field gel electrophoresis (PFGE) was used to ascertain the relatedness of the isolates. Results: Fifty-eight of 91 (63.7%) isolates were putatively methicillin resistant by the phenotypic cefoxitin screen test and oxacillin MICs. However, 43 (47%) of the isolates were genotypically confirmed as MRSA based on PCR detection of the mecA gene. Furthermore, 37.9% of isolates displayed resistance to tetracycline, 19% to trimethoprim-sulphamethoxazole, 15.5% to clindamycin, 12.1% to gentamicin, 13.8% to ciprofloxacin and erythromycin, 6.9% to moxifloxacin and 7.0% to rifampicin. None of the isolates was positive for inducible clindamycin resistance. The prevalence of resistance (mecA, blaZ, aac(6')-aph(2''), tetK, and ermC) and virulence (hla and lukS/F-PV) genes respectively were 74%, 33%, 22%, 19%, 3%, 5% and 3%, with isolates organized in two highly related clades. Conclusion: Results indicate a fairly high occurrence of MRSA, which can complicate the effective therapy of S. aureus infections, necessitating surveillance and stringent infection control programmes to forestall its spread

Bursitis séptica / Septic bursitis

Se reportan seis casos de bursitis séptica vistos en el Hospital Cayetano Heredia entre 1987 y 1991; cinco fueron varones y la edad promedio fue de 51.2 años. Las bursas afectadas fueron: olecraneana (tres casos), prepatelar (dos) e infrapatelar (un caso); el germen más aislado fue S. aureus (cuatro casos), tuvimos además un caso de E. coli y uno en quien se aisló Neumococo. Todos evolucionaron favorablemente con el tratamiento antibiótico

Caracterización bioquímica de cepas de staphylococcus sp. aisladas de muestras clínicas / Biochemical characterization of strains of Staphylococcus sp isolated from clinical samples

Por el creciente rol en infecciones humanas de cepas de género Staphylococcus, en especial coagulasa negativas y el interés por conocer las especies involucradas, se estudiaron 100 cepas de Staphylococcus sp aisladas de diferentes muestras clínicas de pacientes hospitalizados y llevadas al laboratorio de Microbiología del Hospital Dr. Gustavo Fricke de Viña del Mar, Chile. El estudio abarcó un número considerable de pruebas bioquímicas y morfológicas, según los esquemas propuestos por Schleifer-Kloos y Kloos-Schleifer. Se obtuvieron 5 grupos de cepas bien definidas, un grupo que incluyó a 43 cepas coagulasa positivas se identificó con la cepa tipo de S. aureus, aisladas especialmente de procesos supurativos. Los cuatro grupos restantes fueron todos coagulasa negativos, el primer grupo con 25 cepas fue identificado con S. epidermidis, el segundo grupo con 20 cepas fue identificado con S. hominis, el tercero con 8 cepas se identificó como S. haemolyticus y el cuarto grupo con 4 cepas con S. saprophyticus. Destacándose que la mayoría de las especies coagulasa negativas se aislaron de sangre en especial S. hominis, se hacen consideraciones sobre el presunto rol que estas especies jugarían en los procesos infecciosos y la correcta identificación de las especies del género Staphylococcus

Empleo del dot-enzimoinmunoensayo en la valoración de la proteína A de Staphylococcus aureus / Dot-immunobinding assay use in valoration of protein A from Staphylococcus aureus

Se describe un método inmunoenzimático, que, por su gran sensibilidad, permite detectar pequeñas cantidades de proteína A presente en la membrana celular de determinadas cepas de Staphylococcus aureus o la liberada en el medio de cultivo. Esta técnica del dot-enzimoinmunoensayo permite poner en evidencia concentraciones de hasta 0,115 ug.ml-1 de proteína. Comparando los resultados obtenidos con la técnica de inmunodifusión radial, se confirma su mayor sensibilidad y la posibilidad de utilizar un método específico y de fácil realización en el dosaje de proteína A.

Ocorrência simultânea de Staphylococcus aureus enterotoxigênicos nas mäos, boca e fezes em portadores assintomáticos / Simultaneous occurrence of enterotoxigenic Staphylococcus aureus on the hands, mouth and feces of asymptomatic carriers

A possibilidade de ocorrência simultânea de Staphylococcus aureus no nariz, boca, mäos e fezes foi verificada em 112 indivíduos assintomáticos, residentes na cidade de Säo Paulo, SP, Brasil. De 40(35,7%) deles a bactéria em questäo foi isolada de, pelo menos, um dos nichos estudados. Entre estes portadores, 27(67,5%) foram positivos em apenas um dos quatro nichos, 8(20,0%) em dois e 5(12,5%) em três. Das 113 cepas de S. aureus identificadas, 28 (24,8%) isoladas de 9 (22,5) dos portadores revelaram-se tox+. entre essas cepas, 7(25,0%) produziram enterotoxina do tip A, 6(21,4%) do tipo B, 11(39,3%) do tipo C e 4(14,3%) dos tipos A e C simultaneamente. A fagotipagem revelou a predominância de cepas sensíveis aos fagos do Grupo I/III/NC (16,8%). Os resultados obtidos näo demonstraram a ocorrência simultânea de cepas de Staphylococcus aureus em amostras colhidas de boca, mäos e fezes do grupo estudado

Intoxicaçäo alimentar por queijo Minas contaminado com Staphylococcus aureus / Food-poisoning from Minas-type cheese, contamined with Staphylococcus aureus

Relata-se surto de intoxicaçäo alimentar ocorrido em julho de 1987, na cidade de Ouro Preto, MG (Brasil). O alimento causador foi um queijo Minas, contaminado por Staphylococcus aureus ao nivel de 9,3 x 10**7 UFG/g. Detectaram-se cepas produtoras de enterotoxinas do tipo A, B, D e E. A amostra analisada revelou contaminaçäo por coliformes fecais acima de 1,1 x 10**5/g (NMP), mas näo continha Salmonella. Devido aos sintomas característicos e a elevada contaminaçäo, concluiu-se que o Staphylococcus aureus foi o patogênico responsável pelo surto.

Avaliaçäo analítica da produçäo de termonuclease pelo crescimento de Staphylococcus aureus em leite crú e pasteurizado / Analytic evaluation of thermonuclease production by Staphylococcus aureus in raw and pasteurized milk

O crescimento stafilocócico em dois níveis de inóculos, estirpe 100A, foi estudado comparativamente com a produçäo de termonuclease em leite pasteurizado e leite cru. O processo de extraçäo nestes produtos foi avaliado com o método analítico direto. O efeito dos inóculos iniciais de 10**3 e 10**6 UFC/ml no leite pasteurizado mostrou diferença estatisticamente significativa (P < ou = 0,05) no crescimento estafilocócico a 37-C durante 48 horas, com maior crescimento coincidindo com o inóculo mais elevado. Para o leite cru näo houve diferenca significativa entre os inóculos (P > ou = 0,05). Para ambos os produtos näo houve diferenças significativas para a produçäo de termonuclease ( P> ou = 0,05), durante o período de incubaçäo. Houve coerência dos achados entre a enumeraçäo de Staphylococcus aureus e produçäo de termonuclease, entretanto, quanto aos métodos de extraçäo e direto n adetecçäo desta enzima näo se alcançou perfeita concordância nos resultados

Determinaçäo comparativa de termonuclease em creme e manteiga contaminados experimentalmente con Staphylococcus aureus / Comparative determination of thermonuclease in cream and buter experimentally contamined by Staphylococcus aureus

A produçäo de termonuclease estafilocócica em creme e manteiga foi investigada para avaliar a contaminaçäo experimental de dois inóculos (10**3 e 10**6 UFC/ml) de Staphylococcus aureus patogênico. Também, os métodos direto e extrativo para quantificar a termonuclease foram comparados no creme e manteiga, observando-se nos produtos ricos em gordura maior tempo para a centrifugaçäo e difícil separaçäo da enzima precipitada quando se usava o processo extrativo, sugerindo-se por isto ensaios para viabilizar melhor esse método. No período de 48 h de incubaçäo dos inóculos 10**3 e 10**6 UFC/ml no creme näo houve diferença significativa no crescimento do S. aureus, porém para a manteiga registrou-se uma diferença com maior crescimento quando o inóculo foi 10**6 UFC/ml. Apesar de haver maior produçäo de termonuclease no inóculo mais elevado (10**6 UFC/ml), näo foi possível detectar diferenças significativas entre inóculos no creme e manteiga (P > ou = 0,05) para produçäo de termonuclease, talvez devido ao teor lipídico alto nesses produtos lácteos

Calidad microbiológica de los quesos producidos a nivel artesanal en Costa Rica / Microbiological quality of home-made cheese produced in Costa Rica

Se analizaron 205 muestras de quesos hechos a partir de leche cruda entera, los cuales se producen en forma artesanal en seis zonas rurales de Costa Rica. La finalidad fue determinar la calidad microbiológica de los mismos y formular recomendaciones tendientes a reducir al mínimo las condiciones sanitarias deficientes de elaboración del producto. La muestras se recolectaron directamente en las fincas productoras, y se sometieron a los análisis microbiológicos seguientes: Staphylococcus aureus, termonucleasa (TNasa) positivo); Determinación del número más probable (MPN) de coliformes fecales; Recuento total de hongos y levaduras; y Recuento de mesófilas aerobias. Según se contató, todas las muestras contenían altos recuentos de los cuatro microorganismos investigados, demostrando, por conseguiente, la calidad microbiológica deficiente de los quesos producidos artesanalmente. Con base en los resultados obtenidos, se emite una serie de recomendaciones prácticas orientadas a mejorar las condiciones sanitarias inadecuadas bajo las cuales se elabora actualmente el producto